・７Ｏ・ 科技论坛 ＨＰＬＣ法测定吲哚美辛肠溶片含量 于峰 （哈药集团制药总厂，黑龙江哈尔滨１５００００） 摘要：本文采用高效液相测定了吲哚美辛肠溶片中吲哚美辛的含量，固定相为：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｆｉｄｇｅ Ｃ１８液相色谱柱（１５０＂４．６ｍｍ，５ｕｎ）， 甲醇一水一冰醋酸（６０：４０：０．１）为流动相，检测波长为２２８ｎｍ；吲哚美辛在５０￣３５０ ｇ・ｍＬ。范围内呈良好的线性关系。吲哚美辛的平均 回收率为９９．６％，ＩＫＳＤ为Ｏ．９３％（ｎ＝６）；此方法简便、准确、重现性好，可用于吲哚美辛肠溶片中吲哚美辛的含量测定。 关键词：吲哚关辛肠溶片；吲哚美辛；含量 吲哚美辛化学名称为２一甲基一１一（４一氯苯甲酰基）一５一甲 峰面积积分值的ＲＳＤ为０．８２％。结果表明，本实验精密度良好。 氧基一１Ｈ一吲哚一３一乙酸。吲哚美辛是一一种非甾体消炎药物， ２．８重现性试验。分别称取同批吲哚美辛肠溶片样品６份，分别 可用于癌症发热冰有一定的抗肿瘤作用，可抑制结肠肿瘤细胞增殖 依照２．３项下供试品制备方法制备供试品，按质量标准含量测定项 并计算样品的ＲＳＤ值为Ｏ．６１％，结果表明，此含量 并诱导凋亡 。本文采用高效液相法对吲哚美辛肠溶片中的酒吲哚 下方法测定含量，美辛的进行了含量测定。 测定方法的重现性良好。 １仪器与试药 ２．９稳定性试验。依照２－３项下供试品制备方法制备供试品溶 ＳＣＱ—Ｋ００１空气超声波清洗器（上海声彦超声仪器有限公司）； 液，分别在０，２，４，８，１０ｈ精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进 Ｖｅｒｔｅｘ Ｓｔｉ Ｐ５０００高效液相色谱仪ｆ上海禾工科学仪器有限公司）； 样测定，供试品吲哚美辛峰面积积分值的ＲＳＤ为０．６５％。结果表明 ＸＹＦ—Ｈ帕恩特超低有机物型超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）； 吲哚美辛至少在１０ｈ内稳定。 Ｂｉｏｔａｇｅ全自动氮吹浓缩仪（拜泰齐贸易（上海）有限公司）；Ｗａｔｅｒｓ ２．１Ｏ回收率试验。采用加样回收试验，取已知含量的同一批供 ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８液相色谱柱（１５０＂４．６ｒａｍ，５ｕｎ）（上海楚定分析仪器有限 试品各６份，精密称定，分精密添加一定量的吲哚美辛对照品，按供 公司）；ＦＡｔ２０４Ｂ电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）； 试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量）， Ｃｈｅｍｖａｋ无油真空泵（北京桑翌实验仪器研究所）；ＵＶ４５０Ｉ双光束紫 计算回收率。６次测定的平均回收率为９９．６％，ＲＳＤ为０．６６％。 外可见分光光度计（天津港东科技发展股份有限公司）；ＨＩ９８１０３型 ２．１１样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定吲哚美辛肠 便携式酸度计（北京宝云兴业科贸有限公司）。吲哚美辛对照品由中 溶片三批样品中吲哚美辛的含量，结果三批样品的含量分别为标示 国药品生物制品检定所提供。乙腈（济南金贵林化工有限公司）、甲 量的９９．５％、１００．３％、９８．１％。 ３讨论 醇ｆ重庆华东化学材料有限公司）、冰醋酸（青岛新滕光源化工有限公 司１。 分别考察甲醇一水一冰醋酸（６０：４０：０．１），乙腈一四氢呋喃一 ２含量测定 三乙胺磷酸缓冲液（２５：１５：６０），甲醇一水一冰醋酸（６０：４０：０．１），甲 ２．１色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下 醇一乙腈一冰醋酸（６０：４０：０．１）不同比例的流动相，结果以甲醇一 】色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８液相色谱柱；甲醇一水一冰醋酸 水一冰醋酸（６０：４０：０．１）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选 ６０：４０：０．１）为流动相。本方法简单、快捷、准 （６０：４０：０．１）为流动相；检测波长为２２８ｎｍ；流速１．０ｍＬ・ｍｉｎ ；柱温： 用甲醇一水一冰醋酸（３０￣Ｃ。理论板数按酒吲哚美辛峰计算应不得低于２０００。 确。实验表明此方法可用于吲哚美辛肠溶片中吲哚美辛的含量测 ２．２提取方法确定 定。吲哚美辛肠溶片中吲哚美辛的含量为标示量的９５％一１０５％。 ２．２．１提取溶媒的选择。分别选用了稀乙醇、５０％甲醇、流动相对 参考文献 吲哚美辛肠溶片进行提取，结果表明采用稀乙醇提取时吲哚美辛含 『ｌ１孙丽平，段玉龙，侯俊卿等．吲哚美辛栓在肿瘤生物治疗中的应用 。中国肿瘤临床与康复，１９９８，５（４）：６６． ２．２．２提取时间的选择。取吲哚美辛肠溶片适量，研碎，精密称 ｆ２】张桂英，段晓明，袁伟建等．吲哚美辛诱导结肠癌细胞凋亡的分子 定，用稀乙醇超声波振荡分别提取２Ｏ、２５、３０分钟，含量结果表明： 机制Ⅲ．中华消化杂志，２０００，２０（４）：２６７，２６８． ３１杨蕾，高歌．非甾体类抗炎药对胃肠道恶性肿瘤的化学预防『Ｊ】．国 三种提取时间结果无明显差异，为保证提取完全并缩短处理时间， ｆ采用超声提取２５分钟。 外医学——肿瘤学分册，２００２，２９（３）：２２１．２２４． ２．３供试品溶液的制备。取吲哚美辛肠溶片适量，研细，精密称 【４］Ｇｉｏｖａｎｎｕｅｃｉ Ｅ，Ｒｉｍｍ ＥＢ，Ｓｔａｍｐｔｅｒ ＭＪ，ｅｔ ａ１．Ａｓｐｉｉｒｎ ｕｓｅ ａｎｄｔｈｅ ｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ａｄｅｎｏｍａ ｉｎ ｍａｌｅ ｈｅａｈｈｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ 取（约含吲哚美辛１０ｒａｇ），置５ＯｒａＬ量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理 ｒｉｓｋ ｆｏｒ ｃｏｌ提取２５分钟，放置至室温，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜 『Ｊ】．Ａｎｎ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ，１９９４，１２１（４）：２４１—２４６． 『５１张桂英，冷爱民，贺智民等．消炎痛抑制人结肠癌细胞增殖和诱导 （０．４５ ｍ）滤过，即得。 ２．４对照品溶液的制备。精密称取吲哚美辛对照品约１０ｍｇ，置 凋亡的研究『Ｊ１．中国现代医学杂志，１９９８，８（１２）：１－３． ５０ｍＬ容量瓶中，用加稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每１ｍＬ 『６］中国药典ｆＳ］二那『Ｍ１，２００５，８４４． 『７１国家药典委员会冲国药典高效液相色谱图集（第１卷）［Ｍ］．北京：人 溶液中含吲哚美辛０．２ｍｇ）。 ２００５，６８３． ２．５阴性干扰试验：取除吲哚美辛的辅料，按方中比例和制备 民卫生出版社，８１张君仁，臧恒昌．体内药物分析【Ｍ】．北京：化学工业出版社，２００２：１４一 工艺方法制成阴性制剂，用供试品溶液制备的方法，制成阴性对照 『 溶液，用以上选定的测定条件进行吸收曲线绘制，观察在与吲哚美 ｌ５．９１赵排风，郭重伏等．不除肠溶衣测定吲哚美辛肠溶片的含量『ＪＩ．中 辛相同的保留时间处是否存在吸收峰，结果表明：在选定条件下测 ｆ量最高。 得的阴性液吸收曲线在与吲哚美辛相同保留时间处不存在吸收峰， 国药师，２００２，５（１０）：６３４． ［１０１４￣．鸣，黄河，杨德隆，李玲．反相高效液相色谱法测定人血浆中的吲 因此说明选定的条件测定吲哚美辛无干扰，具有较强的专属性。 Ｊ１．中国法医学杂志，２００１，３． ２．６标准曲线的制备。制备浓度为５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、 哚关辛『周大炜，李发美．毛细管电泳一迎头分析法测定血清或血浆中氯氮 ３５０ ｇ・ｍＬ一・的对照品溶液，分别精密吸取１０ Ｌ注入ＨＰＬＣ，记录 『１１１Ｊ］．化学学报，２００４，１３． 色谱图。以峰面积积分值Ａ（ 曲为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标 平的游离浓度『准曲线，计算回归方程。试验表明，吲哚美辛对照品在５０－３５０ ｇ ｍＥ－Ｉ范围内线性关系良好。 ２．７精密度试验。依照２．４项下制备对照品溶液，精密吸取吲哚 美辛对照品溶液１０ Ｌ重复进样６次，测定峰面积积分值，对照品
