PCR移液器操作维护规程

1．目的：确保移液的精确性，正确使用移液器。 2．适用范围：本实验室使用的微量可调式移液器。 3．负责人： 操作人： 4．程序： 4．1移液器的使用

4．1．1转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。

4．1．2 装上配套的Tip。 4．1．3 前进移液法

a） 将按钮压至第一停点位置；

b ）将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。

c） 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。

d）松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换管嘴继续移液操作。 4．1．4 倒退移液法：适用于高粘度液体及/或易起泡沫液体的移液。 a） 将操作按钮向下压至第二停点位置。

b）将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下2~3mm深处，然后慢慢松开钮吸入

液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所有液滴。

c ）轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。

d）遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉，或者放回原来的容器中。 4．1．5 重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。

a）将操作按钮向下压至第二停点位置。

b）将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。

c）轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量液体仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。

d ）将管嘴浸入试剂液面下不远处，然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸

入液体。

e）重复步序c）和d ）继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。 4．2 移液器的维护

每天对使用过的移液器用75%酒精进行擦拭。每周1次对移液器咀进行75%酒精浸泡15分钟左右，若使用过程中发生污染应随时浸泡处理。 4．3移液器的校准

为确保移液器加样的精确性和准确性，正确使用移液器，需定期（一

年）对移液器进行校准 4．3．1 校准环境和用具要求

室温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。

电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称

量时，为保证天平内的湿度（相对湿度60～90%），天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。

小烧杯：5～10mL体积。

测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。 选定校准体积： a）拟校准体积；

b）移液器标定体积的中间体积。

c）最小可调体积（不小于拟定体积的10%）。 如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。 4．3．2 校准步骤

a）将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头； b）调节好天平；

c）来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头； d）垂直握住移液器，将吸头浸入液面2～3mm，缓慢（1～3秒）一致地吸取蒸馏水

e）将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；

f）将移液器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将移液器压至第一档，等待1～3秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；

g）记录称量值； h）擦干吸头外面； i）按上步骤称量10次；

j）取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，按表1所列蒸馏水Z因子计算体积； k）按校准结果调节移液器。 4．3．3 比较校准法

利用经计量局校准并颁发校准报告之同型号移液器，在移液器量程范围的高低两个档各选择一个校准点，利用电子天平称量结果与已校准移液器称量结果进行比较，完成校准。

备注：连续可调移液器校准由本市标准计量局统一校准。

（表1 蒸馏水Z因子 hPa(mbar)）

温度800 （℃） 20 1.0021.0027 10.0021.0028 1.0029 1.0029 6 7 853 907 960 1013 1067 20.5 1.0021.0028 1.0028 1.0029 1.0030 1.0030 7 21 1.0021.0029 1.0030 1.0030 1.0031 1.0031 8 21.5 1.0031.0030 1.0031 1.0031 1.0032 1.0032 0 22 1.0031.0031 1.0032 1.0032 1.0033 1.0033 1 22.5 1.0031.0032 1.0033 1.0033 1.0034 1.0035 2 23 1.0031.0033 1.0034 1.0035 1.0035 1.0036 3 23．5 1.0031.0035 1.0035 1.0036 1.0036 1.0037 4 24 1.0031.0036 1.0036 1.0037 1.0038 1.0038 5 24.5 1.0031.0037 1.0038 1.0038 1.0041 1.0039 7 25 1.0031.0038 1.0039 1.0039 1.0040 1.0041 8 5. 相关记录 仪器使用登记表

仪器设备维护和校准记录表 仪器设备检定周期表 仪器设备维修申请表 仪器报废（停用）单 仪器设备使用授权表 仪器设备档案卡

仪器设备领（借）用登记表 仪 器 设 备 总 表