培养基是指通过组合用于微生物,植物或动物(或组织)的生长和繁殖的不同营养物而制备的营养物培养基。通常,它包含碳水化合物,含氮物质,无机盐(包括微量元素),维生素和水。培养基不仅是提供细胞营养和促进细胞增殖的基本物质,而且还是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基配制 1.成分
配方转换→向容器中添加少量水(蒸馏水,天然水)→根据配方称量各种药物(依次添加)→添加足够的水(每种药物一个勺子,盖上瓶盖服药后立即服用)。 2.解散
淀粉溶解:将少量冷水混合成糊状
必须煮沸加热溶解,特别是与琼脂混合的介质,琼脂的熔化温度为95-97℃,并且需要加热和搅拌以防止燃烧。
3.调整PH
用1N盐酸或1N NaOH将培养基调节至所需值。 4.筛选
用滤纸或棉布过滤。 (有时可以省略) 5.分包装
普通培养基在三角瓶或试管中灭菌。
(1)三角瓶
如果是静态培养,则100ml培养基/ 250ml三角瓶的最大含量不应超过150ml培养基/ 250ml。
三角形的瓶子,否则,灭菌过程中培养基的沸腾将很容易污染卫生棉条并引起细菌污染。如果使用摇瓶培养,则应使用15-20ml培养基/ 250ml三角瓶以确保良好的通风。
(2)试管被分装
液体培养基通常填充4-5ml,约1/4试管高度;
固体倾斜培养基通常填充3-4ml,大约是试管高度的1/5。 6.绷带
包装后,塞上棉塞,并用牛皮纸包裹棉塞,以防止灭菌过程中水分进入并弄湿棉塞。 7.杀菌
根据公式所需的温度和压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌温度过高,营养物质将被破坏和培养
碱中的糖和氨基酸会使培养基的颜色变深。 8.摆坡
灭菌后,需要倾斜的试管应趁热时倾斜放置,以使其固化成倾斜的表面,约占试管长度的1/2。 9.储存
将培养基置于30℃下一天后即可使用而无污染。通常用牛皮纸包装,并保存在2-8℃的冰箱中以备后用
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